1．檢測樣本若渾濁應(yīng)過濾后使用．

2．現(xiàn)場檢測出的陽性樣品應(yīng)采用孔雀石綠速測試劑盒(Ⅱ型) 進行確認或采用液相色譜法測定。

3．孔雀石綠標準工作液的使用：本試劑盒提供的標準工作液可提供初學(xué)者訓(xùn)練。標準工作液濃度為75ug/ml，用前可取水50mL加入1滴標準工作液即得到稀釋到0.075ug／mL的孔雀石綠溶液。取15ml稀釋液通過富集柱，富集柱的填料中有明顯的綠色出現(xiàn)．

 

孔雀石綠快速檢測試劑盒概要

孔雀石綠是一種帶有金屬光澤的綠色結(jié)晶體，又名堿性綠、嚴基塊綠、孔雀綠，其既是殺真菌劑，又是染料，易溶于水，溶液呈藍綠色。長期以來，漁民都用它來預(yù)防魚的水霉病、鰓霉病、小瓜蟲病等，而且為了使鱗受損的魚延長生命，在運輸過程中和存放池內(nèi)，也常使用孔雀石綠。研究顯示，孔雀石綠在魚內(nèi)殘留時間很長，且其具有高毒性、高殘留和致癌、致畸、致突變等副作用，鑒于此，許多國家均將孔雀石綠列為水產(chǎn)養(yǎng)殖禁用藥物。

 

孔雀石綠快速檢測試劑盒采用競爭酶標免疫法，可經(jīng)濟、快速地檢測魚、蝦等樣品中的孔雀石綠、隱性孔雀石綠、結(jié)晶紫等殘留。本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)而成的檢測產(chǎn)品，能大限度地減少操作誤差和工作強度。

 

孔雀石綠快速檢測試劑盒原理

孔雀石綠檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法，同時把隱性孔雀石綠氧化成孔雀石綠，檢測魚、蝦以及魚池或魚缸水樣中的總的孔雀石綠（Malachite Green ，MG），試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時，加入標準品或樣品溶液，樣本中的孔雀石綠和酶標板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗孔雀石綠抗體，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含孔雀石綠含量成負相關(guān)，與標準曲線比較即可得出樣本中孔雀石綠的殘留量。

 

【樣品處理】

一、 水樣：用滴管直接吸取水樣進行檢測。

二、組織樣（蝦要去掉頭和殼后*洗凈，魚要去鱗后洗凈）

1、取切碎的一定量的組織樣本，用均質(zhì)器均質(zhì)；

2、稱取3ｇ已均質(zhì)樣本至15ml離心管中；加入2ml提取劑A，3ml提取劑B，一管氧化劑，在漩渦震蕩儀上充分振蕩混勻3min，或手搖5min,4000r/min離心5min。

3、取上清1ml于5ml離心管中，加兩滴助溶劑。

4、搖晃均勻后,65℃水浴下，氮（空）氣吹干。

5、加入0.2ml底物復(fù)溶液溶洗滌離心管（沖洗完成后立即進行步驟6，間隔時間切勿超過3分鐘）。

6、吸取待檢樣本溶液0.1ml（約三滴）于金標微孔中，用復(fù)溶液滴管輕輕吹打至孔內(nèi)紅色物質(zhì)*溶解，等待反應(yīng)5分鐘。

 

【使用步驟】

1.測試前先完整閱讀使用說明書，使用前將試劑板和待檢樣本溶液回復(fù)至室溫（20℃-30℃）；

2.從原包裝袋中取出檢測卡，水平放置于觀察者正面（打開后立即使用）；

3.吸取金標微孔中的所有溶液加至加樣孔中（見下圖），加樣后開始計時；

4.結(jié)果應(yīng)在 5 - 8 分鐘讀取，其他時間判讀無效。